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—— 最新推出:基因组编辑工具CRISPR/Cas9专家系统 ——               
 

琼脂糖凝胶电泳DNA回收试剂盒实验


 实验步骤:
 1. 用手提式长波紫外灯(照射时间越短越好),判断DNA目的条带的位置。用干净的刀片从琼脂糖凝胶中切下所需DNA条带,将琼脂块切成小块放在1.5ml离心管中。
 2. 按每100mg 琼脂糖加入500ul的溶液P,置于55 - 65oC水浴锅中,中途混匀几次,以完全融化Agarose胶。
 3. 胶完全融化后,加入50ul的溶液S,混匀。将融化的胶溶液转移至吸附柱中,静置2min以上。10,000rpm离心1min。倒掉收集管中废液。
注:一次装不下的溶液,请分2次离心。
 4. 加入550ul溶液W洗涤,10,000rpm离心1min,倒掉收集管中废液。
 5. 重复步骤5。倒掉废液后,将吸附柱重新放回收集管,再10,000rpm离心2分钟,尽量除去残留的溶液W。
 6. 小心安装吸附柱,将其套入一个干净的1.5ml离心管中,在吸附柱的膜中央部加入30ul溶液TE或者是灭菌水。室温放置2min以上,13000rpm离心2min。

 试验例:

  使用本试剂盒回收3例不同长度的PCR产物A、B、C。回收后DNA片段a、b、c连同回收前PCR产物进行1%的琼脂糖凝胶电泳,其结果见图,回收率高达70%以上。




 琼脂糖凝胶回收常见问题解答:

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